laporan penetapan lemak dengan metode ekstraksi soxhlet

PENETAPAN LEMAK DENGAN METODE EKSTRAKSI

SOXHLET

I. Tujuan Praktikum

1.1 Mahasiswa dapat melakukan analisis kadar lemak dalam suatu bahan pangan

1.2 Mahasiswa dapat mengetahui kadar lemak dalam bahan.

II. Dasar teori

Lemak merupakan sekelompok besar molekul-molekul alam yang terdiri atas unsur-unsur karbon, hidrogen, dan oksigen meliputi asam lemak, malam, sterol, vitamin-vitamin yang larut di dalam lemak (contohnya A, D, E, dan K), monogliserida, digliserida, fosfolipid, glikolipid, terpenoid (termasuk di dalamnya getah dan steroid) dan lain-lain. Lemak secara khusus menjadi sebutan bagi minyak hewani pada suhu ruang, lepas dari wujudnya yang padat maupun cair, yang terdapat pada jaringan tubuh yang disebut adiposa (Anonim 2010).

Mengekstraksi lemak secara murni sangat sulit dilakukan, sebab pada waktu mengekstraksi lemak, akan terekstraksi pula zat-zat yang larut dalam lemak seperti sterol, phospholipid, asam lemak bebas, pigmen karotenoid, khlorofil, dan lain-lain. Pelarut yang digunakan harus bebas dari air agar bahan-bahan yang larut dalam air tidak terekstrak dan terhitung sebagai lemak dan keaktifan pelarut tersebut menjadi berkurang. Pelarut ini seperti dietil eter, hexana, benzena, dan lain-lain.

Ada dua kelompok umum untuk mengekstraksi lemak yaitu metode ekstraksi kering dan metode ekstraksi basah. Metode kering pada ekstraksi lemak mempunyai prinsip bahwa mengeluarkan lemak dan zat yang terlarut dalam lemak tersebut dari sampel yang telah kering benar dengan menggunakan pelarut anyhidrous. Keuntungan dari dari metode kering ini, praktikum menjadi amat sederhana, bersifat universal, dan mempunyai ketepatan yang baik. Kelemahannya metode ini membutuhkan waktu yang cukup lama, pelarut yang digunakan mudah terbakar dan adanya zat lain yang ikut terekstrak sebagai lemak.

Prinsip soxhlet ialah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya sehingga terjadi ekstraksi kontiyu dengan jumlah pelarut konstan dengan adanya pendingin balik. Metode soxhlet ini dipilih karena pelarut yang digunakan lebih sedikit (efesiensi bahan) dan larutan sari yang dialirkan melalui sifon tetap tinggal dalam labu, sehingga pelarut yang digunakan untuk mengekstrak sampel selalu baru dan meningkatkan laju ekstraksi. Waktu yang digunakan lebih cepat. Kerugian metode ini ialah pelarut yang digunakan harus mudah menguap dan hanya digunakan untuk ekstraksi senyawa yang tahan panas.

Menurut Lehninger (1982) lemak merupakan bagian dari lipid yang mengandung asam lemak jenuh bersifat padat. Lemak merupakan senyawa organik yang terdapat di alam serta tidak larut dalam air, tetapi larut dalam pelarut organik nonpolar, misalnya dietil eter (C₂H₅OC₂H₅), kloroform (CHCl₃), benzena, hexana dan hidrokarbon lainnya. Lemak dapat larut dalam pelarut tersebut karena lemak mempunyai polaritas yang sama dengan pelarut (Herlina 2002).

Dalam mengetahui kadar lemak yang terdapat di bahan pangan dapat dilakukan denganmengekstraksi lemak. Namun mengekstrak lemak secara murni sangat sulit dilakukan, sebab pada waktu mengekstraksi lemak, akan terekstraksi pula zat-zat yang larut dalam lemak seperti sterol, phospholipid, asam lemak bebas, pigmen karotenoid, khlorofil, dan lain-lain. Pelarut yang digunakan harus bebas dari air (pelarutanhydrous) agar bahan-bahan yang larut dalam air tidak terekstrak dan terhitung sebagai lemak dan keaktivan pelarut tersebut menjadi berkurang.

Sifat-sifat dari lemak dapat diidentifikasi dengan beberapa metode Terdapat dua metode untuk mengekstraksi lemak yaitu metode ekstraksi kering dan metode ekstraksi basah. Metode kering pada ekstraksi lemak mempunyai prinsip bahwa mengeluarkan lemak dan zat yang terlarut dalam lemak tersebut dari sampel yang telah kering benar dengan menggunakan pelarutanhydrous. Keuntungan dari dari metode kering ini, praktikum menjadi amat sederhana, bersifat universal dan mempunyai ketepatan yang baik. Kelemahannya metode ini membutuhkan waktu yang cukup lama, pelarut yang digunakan mudah terbakar dan adanya zat lain yang ikut terekstrak sebagai lemak. Pada praktikum penetapan kadar lemak ini digunakan metode ekstraksi kering yaitu metode Soxhlet.

Praktikum penetapan lemak kasar dan komponen lipid dilakukan dengan tujuan agar praktikan dapat mengetahui kadar lemak yang terkandung dalam suatu bahan pangan. Metode yang digunakan tergolong dalam metode ekstraksi kering yaitu metode Soxhlet

Metode Soxhlet

Metode Soxhlet termasuk jenis ekstraksi menggunakan pelarut semikontinu. Ekstraksi dengan pelarut semikontinu memenuhi ruang ekstraksi selama 5 sampai dengan 10 menit dan secara menyeluruh memenuhi sampel kemudian kembali ke tabung pendidihan. Kandungan lemak diukur melalui berat yang hilang dari contoh atau berat lemak yang dipindahkan. Metode ini menggunakan efek perendaman contoh dan tidak menyebabkan penyaluran. Walaupun begiru, metode ini memerlukan waktu yang lebih lama daripada metode kontinu (Nielsen 1998).

Prinsip Soxhlet ialah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya sehingga terjadi ekstraksi kontiyu dengan jumlah pelarut konstan dengan adanya pendingin balik. Soxhlet terdiri dari pengaduk atau granul anti-bumping, still pot (wadah penyuling,bypass sidearm, thimble selulosa, extraction liquid, syphon arm inlet, syphon arm outlet, expansion adapter, condenser (pendingin), cooling water in, dan cooling water out (Darmasih 1997).

Langkah-langkah dalam metode Soxhlet adalah : menimbang tabung pendidihan ; menuangkan eter anhydrous dalam tabung pendidihan, susun tabung pendidihan, tabung Soxhlet, dan kondensator ; ekstraksi dalam Soxhlet ; mengeringkan tabung pendidihan yang berisi lemak yang terekstraksi pada oven 1000C selama 30 menit ; didinginkan dalam desikator lalu ditimbang (Nielsen 1998).

Sampel yang sudah dihaluskan, ditimbang 5 sampai dengan 10 gram dan kemudian dibungkus atau ditempatkan dalam “Thimble” (selongsong tempat sampel) , di atas sampel ditutup dengan kapas. Pelarut yang digunakan adalah petroleum spiritus dengan titik didih 60 sampai dengan 80°C. Selanjutnya, labu kosong diisi butir batu didih. Fungsi batu didih ialah untuk meratakan panas. Setelah dikeringkan dan didinginkan, labu diisi dengan petroleum spiritus 60 – 80°C sebanyak 175 ml. Digunakan petroleum spiritus karena kelarutan lemak pada pelarut organik. Thimbleyang sudah terisi sampel dimasukan ke dalam Soxhlet. Soxhlet disambungkan dengan labu dan ditempatkan pada alat pemanas listrik serta kondensor . Alat pendingin disambungkan dengan Soxhlet. Air untuk pendingin dijalankan dan alat ekstraksi lemak kemudian mulai dipanaskan (Darmasih 1997).

Ketika pelarut dididihkan, uapnya naik melewati Soxhlet menuju ke pipa pendingin. Air dingin yang dialirkan melewati bagian luar kondensor mengembunkan uap pelarut sehingga kembali ke fase cair, kemudian menetes ke thimble. Pelarut melarutkan lemak dalam thimble, larutan sari ini terkumpul dalamthimble dan bila volumenya telah mencukupi, sari akan dialirkan lewat sifon menuju labu. Proses dari pengembunan hingga pengaliran disebut sebagai refluks. Proses ekstraksi lemak kasar dilakukan selama 6 jam. Setelah proses ekstraksi selesai, pelarut dan lemak dipisahkan melalui proses penyulingan dan dikeringkan (Darmasih 1997).

Faktor yang Memengaruhi Kadar Lemak

Faktor-faktor yang memengaruhi laju ekstraksi adalah tipe persiapan sampel, waktu ekstraksi, kuantitas pelarut, suhu pelarut, dan tipe pelarut. Dibandingkan dengan cara maserasi, ekstraksi dengan Soxhlet memberikan hasil ekstrak yang lebih tinggi karena pada cara ini digunakan pemanasan yang diduga memperbaiki kelarutan ekstrak. Makin polar pelarut, bahan terekstrak yang dihasilkan tidak berbeda untuk kedua macam cara ekstraksi. Fenolat total yang tertinggi didapatkan pada proses ekstraksi menggunakan pelarut etil asetat. Sifat antibakteri tertinggi terjadi pada ekstrak yang diperoleh dari ekstraksi menggunakan pelarut etil asetat untuk ketiga macam bakteri uji Gram-positif. Semua ekstrak tidak menunjukkan daya hambat yang berarti pada semua bakteri uji Gram-negatif (Lucas dan David 1949).

Crackers

Crackers adalah jenis biskuit yang terbuat dari adonan keras melalui proses fermentasi atau pemeraman, berbentuk pipih yang mengarah kepada rasa asin dan renyah, serta bila dipatahkan penampang potongannya berlapis-lapis. Crackers tanpa pemanis merupakan tipe yang paling populer yang dapat dikonsumsi sebagai pengganti roti dan penggunaanya lebih luas sebagai makanan diet. Ciri-ciri crackers yang baik adalah tekstur yang renyah, tidak keras apabila digigit, tidak hancur, dan mudah mencair apabila dikunyah. Bahan-bahan yang digunakan dalam pembuatan crackers dapat dibagi menjadi dua bagian yaitu bahan-bahan yang berfungsi sebagai pengikat dan bahan pelembut tekstur. Bahan pengikat atau pembentuk adonan yang kuat adalah tepung terigu, air, dan garam, sedangkan bahan-bahan yang berfungsi sebagai pelembut tekstur adalah gula, mentega, danleavening agent (baking powder) sebagai bahan pengembang (Manley 2000).

Tabel 1 Syarat mutu biskuit (SNI 01-2973-1992)

Komponen	Syarat Mutu
Air	Maks 5%
Protein	Min 9%
Lemak	Min 9.5%
Karbohidrat	Min 70%
Abu	Maks 1.5%
Logam berbahaya	Negatif
Serat kasar	Maks 0.5%
Kalori (per 100 gr)	Min 400
Jenis tepung	Terigu
Bau dan Rasa	Normal,tidak tengik
Warna	Normal

Sumber: Badan Standarisasi Nasional (1992)

III. Peralatan dan bahan

3.1 alat destilasi : soxchlet lengkap dengan condenser dan labu lemak

3.2 alat pemanas listrik atau penangass uap

3.3 oven

3.4 timbangan analitik

3.5 bahan : susu bubuk full cream

3.6 Ethanol

IV. Posedur percobaan

5.1 Mengambil labu lemak yang ukuran sesuai dengan alat ekstraksi soxhlet yang akan digunakan, keringkan dalam desikator dan timbang.

5.2 Menimbang 5 gram sampel dalam bentuk tepung langsung dalam saringan

timbel, yang sesuai ukurannya, kemudian tutup dengan kapas wool yang bebas

lemak sebagai alternative sampel dapat dibungkus dengan kertas saring.

5.3 Letakkan timbe atau kertas saring yang berisi sampel tersebut dalam alat destilasi

ekstraksi soxhlet, kemudian pasang alat condenser diatasnya dan labu lemak

dibawahnya.

5.4 Menuangkan pelarut heksan atau dietil eter kedalam labu lemak secukupnya,

sesuai dengan ukuran soxhlet yang digunakan.

5.5. Melakukan refluks selama minimum 5 jam sampai perlarut yang ada didalam

labu lemak, tampung pelarutnya. Selanjutnya, labu lemak yang berisi lemak hasil

ekstraksi dipanaskan dalam oven pada suhu 105 oC.

5.6 Setalah direaksikan sampai berat tetap dan dingninkan dalam desikator,

menimbang labu beserta lemaknya tersebut berat lemak.

V. Data pengamatan

· Berat Sampel : 5 gram

· Berat Labu : 122 gram

Perlakuan	Pengamatan
Pada destilasi	Lemak didalam susu akan terekstrasi oleh pelarut lemak (ethanol). Warna Lrutan jenuh/ keruh menandakan lemak terlarut pada ethanol.
Di diamkan lebih kurang 1 minggu	Gumpalan lemak akan terlarut berwarna putih.
Pada alat destilasi	Pada suhu lebih kurang 78 oC (titik didih etanol) pelarut akan teuap lebih dahulu dan lemak nya akan tetap tinggal di dalam labu bundar.
Labu dioven dan ditimbang kerahnya	Massa konstantnya.

Ekstrakis soxhlet

Siklus	Waktu
1 2 3 4 5	50 : 50 : 50 11 : 30 : 00 13 : 40 : 25 16 : 03 : 50 14 : 01 : 00

VI. Perhitungan

· Berat Lemak = ( Berat rata-rata lemak setelah pengeringan ) –

( Berat Labu Bundar kosong )

= 123 gram – 122 gram

= 1 gram

· % Lemak =

= 20 %

VII. Analisa percobaan

Pada percobaan penentuan lemak dengna metode ekstraksi soxhlet ini bertujuan agar dapat menganalisa kadar lemak dalam suatu bahan pangan dan mengetahui kadar lemak dalam bahan. Kami menggunakan bahan berupa susu bubuk. Pelarutnya berupa ethanol 98% sebagai pelarutnya.

Adapun langkah awal yang kami lakukan adalah menimbang 5 gram susu full cream/ susu bubuk tersebut kemudian dimasukkan kedalam sifon. Kemudian ethanol dimasukkan kedalam labu bundar. Lalu direfluks. Tetapi tidak lupa batu didih juga dimaskukkan kedalam labu bundar, tujuannyan agar dapat menurunkan tekanan suhu larutan agar tidak terlalu tinggi. Perefluksan dilakukan sampai pelarut yang turun kembali ke labu bundar lagi ( 5X) dan berwarna jernih.

Proses yang terjadi pada percobaan ini ketika pelarut dididihkan, upaya naik melewati soxhlet menuju ke pipa pendingin. Air dingin yang dididihkan melalui bagian luar condenser mengembunkan uap pelarut sehingga kembali ke fasa cair. Kemudian menetes ke timbel. Pelarut melarutkann lemak didalam timbel, larutan sari ini terkumpul dalam timbel dan bila volemenya telah mencukupi, sari akan dialirkan menuju labu.

Adapun hasil ekstraksi yang didapat kemudian didiamkan selama lebih kurang selama 1 minggu, tujuannya agar untuk mendapatkan lemak yang lebih banyak. Setelah satu minggu, larutan yang telah banyak menggumpal lemaknya didestilasi dan ditampung pelarutnya. Kemudian lemak yang telah didapat dipindahkan kedalam crussible untuk di oven dengan suhu 105 oC. Kemudian lemak yang telah kering, didinginkan kedalam desikator dan kemudian ditimbang. Berat lemak yang dihasilkan seberat 1 gram.

VIII. Kesimpulan

Dari percobaan yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa :

1. Proses ini dilakukan untuk mendapatkan kadar lemak dari suatu bahan pangan

( susu) dengan metode ekstraksi dan destilasi.

2. Kadar lemak dapat dianalisa dengan menggunakan metode ekstraksi dengan peralatan soxhlet.

3. Lemak bebas didestilasi dengan pelarut non polar salah satu contohnya ethanol melalui metode ekstraksi.

4. Factor-faktor yang mempengaruhi laju ekstraksi :

a. Persiapan dan jenis sampel

b. Waktu ekstraksi

c. Kuantitas pelarut

d. Suhu pelarut

e. Tipe pelarut